江蘇省南京市棲霞區和燕路371號 東南大學(xué)國家大學(xué)科技園科創(chuàng )樓A301
PAS染色:
PAS染色法(Periodic Acid-Schiff stain)在組織學(xué)上,主要用來(lái)檢測組織中的糖類(lèi)。過(guò)碘酸把糖類(lèi)相鄰兩個(gè)碳上的羥基氧化成醛基,再用Schiff試劑(堿性品紅與亞硫酸氫鈉)和醛基反應使呈現紫紅色。
實(shí)驗儀器和材料
無(wú)水乙醇
二甲苯
高碘酸
偏重亞硫酸鈉
堿性品紅
蘇木素
中性樹(shù)膠
實(shí)驗步驟
1、石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無(wú)水乙醇Ⅰ10min-無(wú)水乙醇Ⅱ10min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸餾水洗。
2、高碘酸溶液處理:切片入高碘酸溶液10min,流水沖洗5min。
3、Schiff試劑處理:切片入Schiff試劑10min,流水沖洗5min。
4、蘇木素染色:切片入蘇木素染液1min,流水沖洗5min。
5、快速脫水:將切片依次放入95%酒精I 5min -95%酒精II 5min-無(wú)水乙醇Ⅰ5min -無(wú)水乙醇Ⅱ5min -二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min中脫水透明,將切片從二甲苯拿出來(lái)稍晾干,中性樹(shù)膠封片。
6、顯微鏡鏡檢,圖像采集分析。
染色結果:糖原呈紅色,細胞核藍紫色。
注意事項
染色后標本應及早觀(guān)察和記錄,染色后標本保存8天后,將逐漸褪色,保存時(shí)間延長(cháng),褪色更為明顯。